Los investigadores evalúan los anticuerpos que inhiben las variantes de RBD del SARS-CoV-2 con un ensayo novedoso


El agente causante de la enfermedad por coronavirus 2019 (COVID-19), el síndrome respiratorio agudo severo coronavirus 2 (SARS-CoV-2), se identificó por primera vez en Wuhan, China, en diciembre de 2019. Desde entonces, el virus se ha propagado rápidamente por todo el mundo, con la Organización Mundial de la Salud (OMS) declaró al COVID-19 una pandemia mundial en marzo de 2020. Hasta la fecha, el SARS-CoV-2 ha infectado más de 127,3 millones de vidas y más de 2,8 millones de muertes.

Se investigan diversas opciones terapéuticas y se desarrollan vacunas a un ritmo sin precedentes. Sin embargo, ha aumentado la preocupación por la longevidad de estas intervenciones, dada la naturaleza de rápida mutación del virus y con muchas variantes preocupantes del SARS-CoV-2 (incluidos B.1.1.7, P.1 y B.1.35, 501Y. V2) habiendo surgido hacia la última parte de 2020 y principios de 2021. Estas nuevas variantes presentan múltiples mutaciones en residuos clave en el Spike (S) glicoproteína.

Estudio: Evaluación simultánea de anticuerpos que inhiben las variantes de RBD del SARS-CoV-2 con un ensayo multiplex competitivo novedoso.  Haber de imagen: ktsdesign / Shutterstock

El SARS-CoV-2 está coronado con proteínas S, una glicoproteína de envoltura transmembrana homo-trimérica. Se une al receptor de la célula huésped humana ACE2 (enzima convertidora de angiotensina 2), lo que facilita la entrada del virus en la célula huésped.

Si bien el dominio de unión al receptor (RBD) de la proteína S es el objetivo principal del desarrollo de anticuerpos y vacunas, también es el dominio de evolución más rápida en la estructura viral. Estos cambios pueden resultar en la aparición de mutaciones de escape inmunológico, lo que limita la eficacia de las vacunas y la terapéutica de los anticuerpos.

Con la aparición de variantes preocupantes del SARS-CoV-2, es importante centrarse en la ganancia de función, facilitando la infectividad viral, la transmisibilidad o el escape de anticuerpos neutralizantes. Debido a su papel en las variantes en evolución, los científicos se han centrado en la vigilancia de las mutaciones RBD del SARS-CoV-2.

Para evaluar la respuesta inhibitoria de los anticuerpos a las variantes naturales de RBD, simultáneamente, investigadores de Australia desarrollaron un ensayo. Es un ensayo múltiple rápido y de alto rendimiento, mediante el cual los investigadores demostraron dos mecanismos de escape inmunológico.

En este estudio, observaron que los anticuerpos no reconocieron las mutaciones virales o los anticuerpos tienen una capacidad inhibitoria reducida debido a una mayor afinidad de RBD-ACE2 en las variantes.

Un enfoque competitivo en el que los anticuerpos compitan simultáneamente con ACE2 por unirse al RBD puede, por lo tanto, reflejar con mayor precisión la dinámica fisiológica de la infección “.

En un estudio reciente, publicado en el medRxiv* server, un equipo de investigadores discutió el papel potencial de un nuevo ensayo para cerrar una brecha importante en la investigación del SARS-CoV-2. Este ensayo puede arrojar luz sobre 1) la selección de candidatos de anticuerpos monoclonales complementarios y 2) la identificación rápida del escape inmune a las variantes emergentes de RBD después de la vacunación o la infección natural.

En este estudio, los investigadores validaron este rápido ensayo multiplex de alto rendimiento. También evaluaron cómo una selección de variantes de RBD de un solo aminoácido de origen natural observadas durante la vigilancia viral impacta la eficacia potencial de la terapéutica de anticuerpos monoclonales y el reconocimiento por plasma humano convaleciente policlonal.

Este ensayo múltiple de neutralización competitiva permite que los anticuerpos compitan simultáneamente con el receptor ACE2 de la célula huésped para unirse a una serie de variantes de RBD acopladas a perlas magnéticas. Los investigadores ven esto como un enfoque que captura mejor la dinámica fisiológica de la interacción.

En particular, en el escape del reconocimiento de anticuerpos monoclonales, los investigadores demostraron que si bien la variante N501Y fue reconocida con una afinidad relativamente alta por la mayoría de los mAb, la inhibición de N501Y se atenuó en la mayoría de los mAb, posiblemente debido a la mayor afinidad de esta variante por ACE2.

Muchos estudios han demostrado que después de la infección, el potente reconocimiento de RBD anticuerpos neutralizantes son provocadas, que explican la mayor parte de la actividad neutralizante del plasma y la inhibición de la unión de RBD-ACE2. Debido a que aproximadamente el 90% de esta actividad neutralizante ocurre en los sueros inmunes al SARS-CoV-2, estos anticuerpos tienen un gran potencial para ser clínicamente útiles en el tratamiento y prevención de la infección por SARS-CoV-2.

Sin embargo, no existe un método estandarizado para evaluar las concentraciones mediadas por anticuerpos.

neutralización del SARS-CoV-2, que puede explicar la variación entre estudios. Los ensayos de referencia existentes tienen desafíos tales como requisitos de bioseguridad, lentos, difíciles de implementar, limitaciones de escalabilidad o analizar un mutante RDB solo a la vez.

Aunque este ensayo no está destinado a reemplazar los ensayos de neutralización basados ​​en células del SARS-CoV-2 estándar de oro, proporciona una solución simple para examinar ampliamente la diversidad de las especificidades de neutralización del SARS-CoV-2 para una serie de mutantes RBD en un rápido nivel alto. formato de rendimiento, que se puede adaptar fácilmente para incluir nuevas variantes de RBD a medida que surgen “.

Es importante destacar que en estos ensayos, no se considera que los anticuerpos fisiológicamente puedan tener que competir con ACE2 para unirse al RBD. Algunas de estas variantes de RBD tienen una afinidad significativamente mejorada por ACE2.

Este estudio abordó estos problemas y proporcionó un ensayo para la vigilancia de la variante del SARS-CoV-2: un nuevo ensayo de inhibición multiplex RBD-ACE2 de alto rendimiento que mide NAbs del SARS-CoV-2 en múltiples variantes naturales del RBD simultáneamente.

En conclusión, los investigadores revelaron cómo este ensayo multiplex puede servir para marcar variantes de RBD que pueden tener una afinidad mejorada por ACE2, describir y comparar la cinética de unión de varias de estas variantes de RBD de afinidad mejorada y demostrar cómo esta afinidad mejorada por ACE2 puede Reducir la capacidad inhibitoria de ambos mAbs y plasma de convalecencia.

*Noticia importante

medRxiv publica informes científicos preliminares que no son revisados ​​por pares y, por lo tanto, no deben considerarse concluyentes, guiar la práctica clínica / comportamiento relacionado con la salud o tratarse como información establecida.

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